普諾賽直播課
在8月20日普諾賽直播間中,左明祥老師為大家帶來(lái)了《細胞培養實(shí)驗室的環(huán)境要求和監測方法》的專(zhuān)題課程。
直播回放路徑
①可在“武漢普諾賽"微信視頻號查看;
②B站搜索“普諾賽生物",點(diǎn)擊最新視頻觀(guān)看學(xué)習。
每一份好奇心都是推動(dòng)科學(xué)進(jìn)步的力量,針對大家在直播中提出的問(wèn)題,我們特意邀請左老師為大家進(jìn)行深入解答。
另外,我們誠摯地歡迎大家在評論區暢所欲言。無(wú)論是實(shí)驗技術(shù)問(wèn)題還是感興趣的課程主題,我們都將傾聽(tīng)您的每一個(gè)意見(jiàn)并積極回應,也會(huì )根據大家的需求定制專(zhuān)題講座。感謝您的參與和關(guān)注!
直播問(wèn)題解答
問(wèn)
過(guò)濾器和水盤(pán)如何清潔?
在正常情況(未出現污染)下,培養箱的水盤(pán)應使用75%酒精擦拭消毒,然后加入無(wú)菌水并添加適量的抑菌劑。當培養箱出現污染時(shí),可以使用新潔爾滅消毒液或3%的過(guò)氧化氫消毒液對水盤(pán)進(jìn)行消毒,消毒時(shí)間為30 min。此外,也可以使用紫外燈進(jìn)行消毒處理,消毒完成后用無(wú)菌水擦拭干凈,添加無(wú)菌水和抑菌劑后正常使用。
培養箱內的HEPA過(guò)濾器一般不需要單獨清潔,當使用出現異常時(shí)可以進(jìn)行更換(需要專(zhuān)業(yè)維修人員更換)。對于超凈工作臺和生物安全柜中的過(guò)濾器,只需根據實(shí)際使用情況,定期(半年至一年)更換初效濾網(wǎng)即可。
問(wèn)
消毒時(shí)間多久合適?
使用消毒液消毒,時(shí)間30 min左右即可;若使用的消毒液存在腐蝕性,應在消毒完成后使用無(wú)菌水將消毒液擦拭干凈。使用臭氧或紫外燈的消毒時(shí)間一般也是30 min。
問(wèn)
怎樣檢測二氧化碳泄漏?
如果需要檢測泄漏至空氣中的CO2濃度,防止其濃度過(guò)高可能引發(fā)的窒息風(fēng)險,可以使用專(zhuān)門(mén)的CO2濃度檢測儀,或者使用氧氣濃度監測儀(適用于多種氣體環(huán)境,如含CO2或氮氣的)。
如果是要檢測管道泄漏的位置,初步的檢查方法可以是使用肥皂水在管道的接頭位置進(jìn)行涂抹,觀(guān)察是否出現氣泡;如需要準確檢測,則需專(zhuān)業(yè)人員使用專(zhuān)業(yè)檢測工具進(jìn)行檢測。
問(wèn)
細胞培養間的實(shí)驗服怎么消毒和存放比較合適?
實(shí)驗服在清洗完成之后,可以放在專(zhuān)用的滅菌袋中,再放進(jìn)高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行滅菌處理。滅菌完成后,將實(shí)驗服連同滅菌袋一起放入烘箱中烘干備用。
問(wèn)
臭氧消毒適用于什么實(shí)驗室?
臭氧消毒適用于配套有新風(fēng)系統的實(shí)驗室。臭氧一般需要通過(guò)新風(fēng)系統進(jìn)入實(shí)驗室空間,并在空間內達到一定濃度才能起到較好的消毒效果。消毒完成之后,也需要通過(guò)新風(fēng)系統將殘留的臭氧排出實(shí)驗室,否則會(huì )對實(shí)驗室環(huán)境產(chǎn)生影響。
問(wèn)
支原體檢測沒(méi)有污染,但細胞狀態(tài)不好,考慮什么污染呢?
細胞狀態(tài)不好的因素有很多,首要且關(guān)鍵的一步是排除污染因素。如果通過(guò)各種檢測手段(細菌、真菌通過(guò)瓊脂板或空培檢測,支原體使用試劑盒檢測)都無(wú)法檢測到污染,則可能不是因污染導致的。
如果仍懷疑存在污染,可以嘗試向培養物中添加適當濃度的廣譜抗生素。如果添加抗生素后細胞狀態(tài)明顯好轉,說(shuō)明確實(shí)存在某種難以檢測的微生物影響細胞狀態(tài);如果添加抗生素后細胞狀態(tài)未出現好轉甚至更差,則需從其他方面排查細胞狀態(tài)不好的原因,如培養基成分、培養條件、細胞特性或外部操作因素等。
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